分析药物筛选测定

阅读次数：16049 发布时间：2016/12/29 17:12:03

药物筛选是确定药物效用必不可少的一步，要知道抗癌药物或抗体药物偶联物筛选测定是确立药物候选物在杀死癌细胞中的效用的步。然而，整个过程的药物筛选测定是耗时和繁琐的。这篇文章的目的是使体外筛选测定更容易。

简单来说，药物筛选可被分解为3步。

步：细胞培养（plate 1）

. 仔细选择目标细胞，来测试化合物的功效。通常，选择癌细胞系（组织特异性肿瘤类，耐药/敏感性癌症）用于药物筛选。

. 使用96孔板，覆盖广泛的浓度范围。

. 在200μl培养基/孔中保持铺板密度为5000-20,000个细胞。密度将取决于细胞生长和孵育时间（24,48或72小时）。准备大量的细胞稀释液。

. 一个96孔板可以测定两类药物（药物1：行A-D，列2-12；药物2：行E-H，列2-12）中的两种药物的测试。

第二步：药物稀释 (plate 2)

. 这一步需要计算。你需要决定化合物的测试范围。这通常基于与化合物的抗癌效率/毒性范围相关的先前报道。如果你是个测试者，简单地测试3个浓度范围（如100μM，10μM和1μM）。

. 一旦你知道原始浓度范围，决定目标细胞能承受的浓度。将该浓度乘以2，即是工作浓度。

第三步：药物与细胞融合

. 弃掉Plate 1的整个培养基。使用多通道移液枪，将95ul新鲜培养基转移到Plate 1的每个孔中。然后，将95ul上述药物稀释物从Plate 2转移到Plate 1相同（对应）的孔中。这时的阴性对照为：A1，B1，C1，D1；阳性（无药物）对照为：E1，F1，G1，H1。孵育细胞。

. 一旦孵育完成，使用任何细胞活力/细胞毒性分析来测试候选药物。

原创作者：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司

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