抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒开始促销啦

阅读次数：16006 发布时间：2017/9/19 11:02:39

抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒基本信息

人类TRACP 是位于第19号染色体P13.2～13.3 处的一个基因编码的单一同工酶, 该酶是一种结构高度保守的含铁糖蛋白, 分子量约30～40kD , 只有红细胞TRACP 的分子量为17kD。不同人种来源的30～40kDTRACP 氨基酸序列的同源性为85%～95% , 其差异性起源于转录初期的可选择性剪接和使用不同的翻译起始部位,或翻译后蛋白质的修饰, 而不是产生于多基因家族。从人体胎盘和脾脏来源的TRACPcDNA 已克隆分离, 且由此推论出的氨基酸序列是相同的(除少量残基外) 。

抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒操作方法

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。