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阅读次数 ：16098 发布时间：2018/3/12 16:04:17
内毒素定量检测试剂盒的原理和用途-5357cc拉斯维加斯首页入口生物【用途】显色基质鲎试剂 ( Chromogenic End-point Tachypleus Amebocyte Lysate , CE TAL )用于体外细菌内毒素的定量检测，禁止以任何途径进入机体 。
【原理】鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中 含有Ｃ因子 、Ｂ因子、凝固酶原 、凝固蛋白原等 。在适宜的条件下（温 度，pH 值及无干扰物质），细菌内毒素激活 C 因子，引起一系列酶促反应， 激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质 ，使其分解为 多肽和黄色的对硝基苯胺（pNA ，λmax = 405nm） 。在一定时间内 ，pNA 的 生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。 同时 ，对硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色（λmax = 545nm）， 避免了供试品本身的颜色对 405nm 处吸收峰的干扰 。
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【检测限】按反应时间不同可检测 0.1EU/ml-1 EU/ml 和 0.01EU/ml -0.1EU/ml 两个区 间( 反应时间 T 1 和 T 2 见出厂检验报告) 。
【试剂盒组成】
细菌内毒素工作品，5 支 鲎试剂 ， 1.7ml/支 ，5 支 显色基质，1.7ml/支，5 支 偶氮化试剂 1，10ml/支，5 支 偶氮化试剂 2，10ml/支 ，5 支 偶氮化试剂 3，10ml/支 ，5 支 HCl (反应终止剂)， 50ml/瓶 ，1 瓶
细菌内毒素检查用水 ，50ml/瓶，3 瓶
【贮存】阴凉处, *佳 2-8℃,避光贮存。
供试品的贮存与预处理
备注： 若供试品为血液类 ，请参照我厂配套血液相关处理试剂使用说明书。
1 供试品的 pH 值应在 6 - 8 之间，若超出此范围，需用无热原缓冲液 、0.1N 氢氧化钠 或 0.1N 盐酸调节。
2 若供试品中可能存在鲎实验的干扰物质，处理参见【供试品的干扰试验】。
3 若供试品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖会产生 G 因子旁路反应 ，干扰内毒素 检测），需选用特异性鲎试剂（我公司提供）。
4 若供试品为一些抗菌素如头孢类抗菌素和磺胺制剂会对偶氮染色剂产生偶联反应 而干扰偶氮化显色，需要选用不含偶氮化试剂的试剂盒（我公司提供）。
5 若供试品的本底吸光度值大于 0.5,必须对供试品进行稀释后再检测。
6 若供试品颜色较深(例如溶血)，或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质), 必须设置供试品空白管以扣除供试品自身的颜色本底 。 供试品空白管不加入鲎试剂，以等体积鲎试剂的溶剂(该处为细菌内毒素检查用水) 代替。其余操作同供试品管 。
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