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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒现货供应!

阅读次数 :16006    发布时间:2018/8/13 16:01:37

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒现货供应 !


产品简介 :


MTT 比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂 盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity AssayKit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性 的检测。MTT 检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT 还原为水丌溶性的蓝紫色 Formazan 并沉积在细胞中 ,而死细胞无此功能。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解 。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度 。细胞增殖越多越快 , 则吸光度越高 ;细胞毒性越大,则吸光度越低。eMTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒采用了自主研发 Formazan solvent,使检测本底低,灵敏度高 ,线性范围宽。


产品组成:

500T
试剂(A): MTT solution(5mg/ml) 5ml -20℃ 避光
试剂(B): Formazan solvent 60ml RT
使用说明书 1 份


自备材料:

1、 细胞培养液
2、 胰蛋白酶消化液
3、 低速
4、 96 孔培养板
5 、 细胞计数板或计数器
6、 细胞培养箱
7、 摇床
8、 显微镜
9、 酶联免疫检测仪

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒现货供应!


操作步骤(仅供参考):


1 、细胞用含血清的培养液培养至对数生长期,常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化) 。

2、低速离心 ,收集细胞沉淀。

3 、用培养液重悬细胞沉淀 ,制备成单细胞悬液,并计数 。

4、 细胞接种于 96 孔培养板,一般接种密度为 3000~10000 个细胞/孔。通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞,胞毒性实验每孔加入 6000 个细胞 。具体每孔所用的细胞的 数目 ,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定。

5 、 37℃ 5%CO2 继续培养或按照实验具体需要进行培养,一般培养 6~24h。

6、 按照实验具体要求,给予 0~20μl 干预药物处理 ,37℃ 5%CO2继续培养至合适时间 。

7、 弃培养液,每孔加入 10μl MTT solution 和 100μl 新鲜培养液 ,在细胞培养箱内继续 孵育 4h 。

8、弃培养液,每孔加入 110μl Formazan solvent,置摇床上低速振荡 10 min ,使结晶物 充分溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短一些 。如果紫色结晶较大或较多, 溶解的时间会长一些。

9 、在酶联免疫检测仪 570nm 测定各孔吸光度。


注意事项 :

1、 MTT solution 尽量减少反复冻融的次数,当颜色变为灰绿色时,请勿使用 。

2、 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长 ,应注意蒸发问题 。

3、 MTT solution 在低温情况下会凝固 ,置于室温或 20~25℃水浴至全部融解后使用 。

4、 Formazan solvent 可以-20℃储存,当产生沉淀或凝固时可以37℃水浴孵育以促进溶 解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。

5、 观察 formazan 是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察 。

6、 培养细胞时尽量细菌避免污染。

7 、 应注意设立 OD 调零孔和对照 。

8 、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作 。 有效期: 12 个月有效。


MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒现货供应!

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