6-磷酸葡萄糖脱氢酶检测试剂盒操作原理!
测定意义:
G6PDH(EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊糖途径的关键酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯,同时将NADP+还原为NADPH,供生物合成及维持细胞内的还原状态用。因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷ (V 样×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g 组织每分钟生成1 nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。G6PDH(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=1286×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1 万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。G6PDH(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V 样÷V 样总) ÷T=0.643×ΔAV 反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADPH 摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96 孔板光径,0.5cm;V 样:加入样本体积,0.01 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000 万。
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