甲胎蛋白(AFP)放免试剂盒实验原理！

阅读次数：15976 发布时间：2019/6/14 9:44:09

甲胎蛋白(AFP)放免试剂盒实验原理！

甲胎蛋白是一种糖蛋白，它属于白蛋白家族，主要由胎儿肝细胞及卵黄囊合成。甲胎蛋白在胎儿血液循环中具有较高的浓度，出生后则下降，至生后2～3月甲胎蛋白基本被白蛋白替代，血液中较难检出，故在成人血清中含量极低。甲胎蛋白具有很多重要的生理功能，包括运输功能、作为生长调节因子的双向调节功能、免疫抑制、T淋巴细胞诱导凋亡等。

[使用目的]
用于人血清样本中甲胎蛋白的定量测定

[试验原理]
血清中甲胎蛋白的检测主要用于 1、原发性肝细胞癌的诊断和监测。AFP 的测定为原发性肝细胞癌的早期诊断和监测及肝癌流行病调查和理论研究提供了重要依据，是*有用的肿瘤标志物。2.通过血清及羊水 AFP 的检测对先天性胎儿畸形的早期诊断有实用价值。

本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含甲胎蛋白的样品和 125I 标记的甲胎蛋白与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中 AFP的浓度。

[实验方法]
1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少 30 分钟以上才可进行操作；
2、取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本 100µl 加入相应编号的试管中；
4、每管均各加入 100µl 标记物工作液；
5、每管均各加入 100µl 抗体工作液，充分混匀；
6、 37℃温育 3 小时；
7、每管均各加入 500µl 分离剂后，充分混匀；
8、室温放置 30 分钟后，离心 3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液；
9、用 γ-计数器测定每管 1 分钟的放射性强度计数；
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。