5357cc拉斯维加斯首页入口生物低价销售酰基转移酶（AAT）试剂盒
5357cc拉斯维加斯首页入口生物专业提供酰基转移酶（AAT）试剂盒，产品质量稳定 ，价格优惠，确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。本产品低价促销，数量不多 ，欢迎老师订购咨询！
测定意义 ：
AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应 ，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
测定原理 ：
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇 ，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰 ，测定412nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。
自备和用品 ：
研钵、冰、台式、紫外分光光度计/酶标仪 、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体100 mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体25 mL×1瓶，4℃保存。
试剂三 ：粉剂×1管，-20℃保存。临用前加蒸馏水1mL充分溶解，4℃保存。
试剂四 ：液体2 mL×1管，4℃保存。
试剂五：粉剂×1管 ，4℃避光保存 。临用前加入试剂二1mL充分溶解，4℃避光保存。
粗酶液提取：
称取约0.1g样品，加试剂一1mL，冰上充分研磨 ，16000g 4℃离心20min ，取上清液待测。
AAT测定操作：
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到412 nm，蒸馏水调零 ；水浴锅35℃预热。
2. 对照管 ：依次在500μL EP管中依次加入140μL试剂二、10μL试剂三、20μL试剂四和10μL试剂五 ，20μL待测液，室温放置10min后于412nm测定吸光度，记为A1。
3. 测定管：依次在500μL EP管中依次加入140μL试剂二、10μL试剂三、20μL试剂四和20μL待测液，35℃水浴15min，加10μL试剂五，室温放置10min后于412nm测定吸光度，记为A2 。△A测=A2-A1 。
AAT活性计算：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按蛋白浓度计算
AAT活力单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U prot) = 1000×△A测×V总÷(Cpr×V样) ÷T= 666.7×△A测÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
AAT活力单位定义：37℃中每克组织每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U 。
AAT (U/g 鲜重) = 1000×△A测×V总÷(V样÷V样总×W) ÷T= 666.7×△A测÷W
Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL ，蛋白质浓度需要另外测定 ；V样：加入反应体系中上清液体积，0.02mL ；V总：反应总体积 ，0.2 mL ；W ：样品质量；V样总 ：提取液体积，1 mL ；T ：反应时间 ，15min。
b.使用96孔板测定的计算公式如下
（1）按蛋白浓度计算
AAT活力单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.0005个单位为1U。
AAT (U prot) = 2000×△A测×V总÷(Cpr×V样) ÷T=1333.4×△A测÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
AAT活力单位定义 ：37℃中每克组织每分钟催化吸光值变化0.0005个单位为1U 。
AAT (U/g 鲜重) = 2000×△A测×V总÷(V样÷V样总×W) ÷T= 1333.4×△A测÷W
Cpr ：上清液蛋白浓度，mg/mL，蛋白质浓度需要另外测定；V样：加入反应体系中上清液体积 ，0.02mL；V总 ：反应总体积，0.2 mL；W ：样品质量；V样总：提取液体积，1 mL；T：反应时间 ，15min 。
注意事项：
上清液蛋白质含量需要另外测定。建议购买本公司生产的BCA蛋白质含量测定试剂盒 。
5357cc拉斯维加斯首页入口生物拥有一支在试剂研发、抗体研究 、生产及质量管理方面具有丰富经验的高素质人才队伍。环境优美、整洁，从细胞培养、蛋白纯化、疫苗配制到小容量注射剂、分装及全套生产线 。检验仪器均采用国内外设备。的厂房设施、精良的仪器设备，从而确保了产品的质量和检测的快速、准确、方便，在同行业中一直名列前茅。产品现货供应，欢迎大家订购咨询。
原创作者：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司
