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阅读次数:15850 发布时间:2019/11/6 17:23:49
5357cc拉斯维加斯首页入口生物专业提供葡萄糖氧化酶,产品质量稳定,价格优惠,确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。本产品低价促销,欢迎新老客户前来咨询订购.测定意义
GOD(EC 1.1.3.4)广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径。
测定原理
GOD催化产生H2O2,过氧化物酶在有氧存在时催化H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生成有色物质,颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。
试验中所需的和设备
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制
提取液:液体×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体×1支,4℃保存;
样品测定的准备
组织处理:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
血清(浆):直接检测。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至500nm,蒸馏水调零。
2、GOD检测工作液的配制:用时将试剂二和试剂三转移至试剂一中,充分混匀,待用。
3、测定前将GOD检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。
4、在EP管中加入10μL样本和240μL工作液,立即混匀并计时,立即取200µL转移至微量石英比色皿或96孔板中,记录500nm下20s吸光值A1和1min20s后的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。
原创作者:南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司