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阅读次数:15921 发布时间:2019/11/19 14:28:46
测定意义:
S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-β-GC能够催化对-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计、台式、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10mL双蒸水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶,4℃保存;
测定步骤:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
试剂一(μL) | 25 | 25 |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min
试剂二(μL) | 400 |
|
试剂三(μL) | 500 | 500 |
混匀, 37℃水浴1h后,立即沸水浴煮沸5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却
试剂二(μL) |
| 400 |
充分混匀,10000g常温离心10min,取上清液
上清液(μL) | 500 | 500 |
试剂四(μL) | 1000 | 1000 |
充分混匀,室温静置2min后,用对照管调零,400nm处测定吸光值A
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