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[试验原理]
人体血液中三碘甲腺原氨酸 T3和甲状腺素 T4的绝大部分与甲状腺结合球蛋白和白蛋白结合进行循环,但结合部分的激素没有生物活性,真正具有生物活性的只是极小部分游离激素,即占总三碘甲腺原氨酸 TT30.3%的游离三碘甲腺原氨酸 FT3 和占总甲状腺素 TT40.03%的游离甲状腺素 FT4。所以血清中 FT3和 FT4浓度更能反映甲状腺功能状态水平。
本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含游离甲状腺素(FreeThyroxine)的样品和 125I 标记的游离甲状腺素(FT4)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中 FT4的浓度。
[样本要求]
110 微升人血清样本。采静脉血 5ml 于塑料试管中,静置使其凝固后,1500 转/分离心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果样本不立即使用,可在-18℃~-25℃储存 6 个月。严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。
[实验方法]
1、 将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、 取每个浓度的标准品、质控血清和样本 50µl 加入相应编号的试管中;
4、 每管均各加入 100µl 标记物工作液;
5、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 100µl 抗体工作液,充分混匀;
6、 37℃温育 1 小时;
7、 每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
8、 离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液;
9、 用 γ-计数器测定每管 1 分钟的放射性强度计数;
10、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
[注意事项]
1、全部试剂应避光贮于 2-8℃并在使用前应在室温下(17-27℃)平衡。
2、该产品在制备过程中所用的血清均经检测,他们对 HBsAg、HIV 无反应。但即使这样也
不会保证对所有的传染性因素进行检测。由于没有一个明确的测试方法能完全保证不会出现
HBsAg、HIV 或其他传染病毒,所以所有的产品包括来自人体的物质都应按良好的实验室规
范,按疾病预防和控制中心的有关规定要求进行预防。
3、样本浓度过高,在分析前用保温液稀释,结果乘以稀释倍数。
4、单位换算:pg/ml=pmol/L×0.777
5、血清正常值,仅供参考,使用单位应建立自己实验室的正常值。
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原创作者:南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司