新品推荐-羊口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒【产品名称】
通用名称：口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒
英文名称：Liquid-phase Blocking ELISA Kit for Detecting FMDV Type O Antibodies
【规格】96T×2块
【用途】
检测羊血清中的口蹄疫O型抗体，适用于动物疫苗免疫抗体监测 。
【储藏与有效期】2～8℃保存 ，有效期12个月 。
【试验操作】
1、洗涤液配制
将浓缩洗涤液(20×)用蒸馏水或去离子水稀释成洗涤液(1×)，即1份浓缩洗涤液加入19份蒸馏水 ，配制的洗涤液(1×)作为洗板用。
2、定性检测方案(单孔定性 ，每板检测92份血清样本)
【操作步骤】
2.1加样:设阴性对照血清(A1B1)和阳性血清(C1D1)各2孔 ，直接加入50ul/孔对照血清；其它为被检样品孔，预先在相应孔内加入45ul的稀释液 ，接着加入5ul/孔待检血清；*后 ，在所有孔内均加入50ul的HRP-O型FMD单抗，被检血清即为1：20稀释。振荡，混匀 ，37℃温育30分钟。
2.2TMB底物：用洗涤液洗板3遍，*后一次拍干，加入TMB底物 ，50ul/孔，37℃温育15分钟 。
2.3反应终止 ： 加入终止液，50ul/孔，终止反应。
2.4读值：酶标仪450nm波长读数。
定量检测方案(每板检测10或20份血清样本)
在使用前，所有的试剂盒组份应恢复到室温 。试剂应轻轻旋转或振荡混匀 。每个样品使用一个单独的吸头 。
3.1样品稀释: 取出FMD－O抗原包被板 ，根据不同的需要，选择图1或图2中的一种布局进行操作。图1为可检测10份样品布局图；图2为可检测20份样品布局图 。每次试验 ，每板均需设置阴阳性血清对照及4孔不加血清单抗对照 。
以图1为例操作，A1～A10每孔各加75µL的稀释液 ，其它所有孔内各加入50µL的稀释液。A1～A10每孔各加25µL的待检样品，A11孔加50µL的阳性对照 ，A12孔加50µL的阴性对照 ，用排枪吹打混匀（每孔吹打3～5次），待检样品A1～A10分别以50µL/孔的量从A到H连续2倍稀释 ；阳性对照A11以50µL/孔的量从A到H连续2倍稀释 ；阴性对照A12以50µL/孔的量从A到B连续2倍稀释 。待检样品在第1～10列从1:4稀释至1:512；阳性对照，从1:2稀释至1:256，由于试剂盒提供的阳性对照已1:4稀释，则变为从1:8稀释至1:1024 ；阴性对照，从1:2稀释至1:4。
3.2 加入HRP－O型FMD单抗：样品稀释好后，在所有孔内加入50ul的HRP－O型FMD单抗，反应体系即为100µL/孔。加样完毕后 ，所有稀释度翻倍，待检样品从1:8～1:1024，阳性对照从1:16～1:2048，阴性对照从1:4～1:8，贴封板膜，振荡混匀。将加好样的ELISA反应板置于37℃温育30分钟 。
4 、注意事项
4.1 为使您的实验获得正确结果，请您在实验前仔细阅读本说明书 。
4.2 所有试剂使用前恢复至室温(18～26℃)，以免温度过低影响抗原抗体反应 。
4.3实验前应用温度计检查温箱温度，温度过高或过低影响OD值高低。
4.4 包被板反应时严禁堆叠放置 ，应该平铺且板间有空隙 ，不要离温箱壁太近。
4.5实验所用移液器及设备应定期校准。
4.6采集的样品要新鲜 ，并且不要溶血。血清标本在2～8℃放置不要超过2天 ，室温不超过8小时，如需长时间放置应储存于-20℃。
新品推荐-羊口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒
原创作者 ：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司
