腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（ADP，AGP）活性检测试剂盒样品的制备AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中，催化葡萄糖-1-磷酸与ATP 反应生成淀粉合成的直接前体ADPG ，是植物淀粉生物合成的主要限速步骤 。
测定原理
AGP 催化的逆向反应生成G1P，在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH ，340nm 下测定NADPH 增加速率，即可计算AGP 活性。
需自备的的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵 、冰和蒸馏水
试剂的组成和配制
提取液 ：液体100mL×1 瓶 ，4℃保存;
试剂一 ：液体20mL×1 瓶 ，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶 ，4℃保存；临用前加入9mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存 ，禁止反复冻融；
试剂三 ：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入5mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存 ，禁止反复冻融；
粗酶液制备
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织 ，加入1mL提取液） ，进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
AGP 活性计算
1 、按样本蛋白蛋白浓度计算
单位的定义 ：每mg 组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH 定义为一个酶活性单位。AGP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T×稀释倍数=2813×ΔA÷Cpr此法需要自行测定样本蛋白质浓度 。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义：每g 组织每分钟催化产生1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。AGP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W× V 样÷V 样总）÷T×稀释倍数=2813×ΔA÷WV 反总 ：反应体系总体积，1×10-3 L ；ε ：NADPH 摩尔消光系数 ，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm ；V 样：加入样本体积，0.04mL ；V 样总 ：加入提取液体积，1 mL ；T：反应时间 ，2 min；稀释倍数 ：1.4；Cpr：样本蛋白质浓度 ，mg/mL ；W：样本质量。
原创作者：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司
