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ELISA实验操作前的注意事项

阅读次数:15482    发布时间:2023/9/20 13:15:18

ELISA实验操作前的注意事项

  1 、样本要求:样本应清澈透明 ,悬浮物应离心去除;避免使用溶血、高血脂样本。样本收集后若不立即检测,冻存于-80°冰箱 ,避免反复冻融。样本每次检测使用前要混匀,用完后将相应版布局及样本编号记录在实验本上,样本及时放入冰箱。

  2、实验前准备

  1.对应订单找到相应的样本和试剂盒 。

  2.核对样本个数 、种类、编号 、样本量是否足够,核对试剂盒种属 、个数 、日期  ,确定试剂盒是否够用 、有没有过期 。

  3.注意订单上备注栏客户的要求,是否做复孔等 。(以上三点有问题在实验前及时与销售沟通)

  注:安排好时间,注意实验节奏,做好相应的记录帮助记忆,安排要有条理。

  3、操作要求

  1.试剂盒在使用前要平衡到室温,底物在使用前应保存在暗处,避光;

  2.正式实验前需做预实验确定合适的稀释倍数 ,做预实验前注意说明书上建议稀释倍数  。预实验双抗夹心法选取标曲两个点,竞争法选取标曲点与点,选取两个样本根据建议稀释倍数稀释三个梯度;

  3.孵育温度与时间准确;洗板非常重要,每步洗板都一定要洗干净;

  4.标准品在用前稀释,且稀释的每一步都要混匀,注意标曲的起始浓度是否与重溶浓度一致;

  5.点样量一定要,打尽移液枪内样本与试剂,快速、等量的将试剂分配到各个微孔中;

  6.抗体和HRP稀释倍数要严格按照说明书规定稀释;

  7.各步骤之间,需用封板贴密封反应板避免蒸发;实验一旦开始 ,应连续完成所有的实验步骤 ,切勿中断。

 

ELISA实验操作前的注意事项

原创作者:南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司

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