维生素B1检测试剂盒(荧光光度法)的注意事项

阅读次数：15568 发布时间：2023/12/27 14:39:25

维生素B1检测试剂盒(荧光光度法)的注意事项

产品简介:

维生素 B1(Vitamin B1)又称硫胺素，属于水溶性维生素，在有氧化剂存在时容易被氧化产生脱氢硫胺素，后者在有紫外光照射时呈现蓝色荧光。维生素B1检测试剂盒(荧光光度法)是利用 Vitamin B1溶液在性盐溶液中能被氧化成蓝色的硫色素(一种荧光化合物)，在紫外线下硫色素发出荧光，在激发波长365nm，发射波长 435nm，在没有其他荧光物质干扰时荧光强度与硫色素的浓度呈正比，可定量检测维生素 B1的含量，如果样品中存在干扰物质，可用沸石吸附 Vitamin B1以便去除待测样品中千扰荧光测定的杂质。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

操作步骤(仅供参考):1、稀释组织匀浆液 : 按组织浆液(10x)蒸水=1: 9 的比例稀释，获得 1组织浆液2、稀释标准品: 取适量的 Vitamin B,标准(100pg/ml)，按 Vitamin B标准(100pg/ml):蒸水=1: 99 稀释成 Vitamin B,标准(1pg/ml)，4C避光保存3、制备亚硫酸盐工作液 : 取一支过剂-亚硫酸盐 100mg 粉末，充分解于 0.5ml 蒸水中配制成200mg/ml的亚硫酸盐工作液，即配即用(选做)制备样品: 取待测材料如麦等，准确称量 2~5g，加入研磨器内，加入少量 1x4组织匀浆液，研磨碎，再次用 1x组织匀浆液研磨，一井倒入 50ml 离心管，补充1*组织匀浆液至25ml，充分混匀，沸水中育 30min，冷却至室温，用样品校正液调节 pH至4.5，3500g 离心10min，取上清加入 2g沸石，振摇 30min，弃液，燕遛水清洗沸石2次，弃洗液，加入 2.5ml 样品洗脱液搅拌沸石，洗脱 2~3 次，将洗脱液合并，并用样品洗脱液定容至 10ml，即为样品净化液5、Vitamin B,氧化: 按下表操作，注意避光操作。剧烈振摇 90s，静置分层，吸取下层溶液丢弃;上层洛液加入 1.5 硫酸盐混匀使脱水。6、Vitamin B,检测 :选用恰当的滤色片，测定的激发波长为 365nm，发射波长为 435nm提前预热仪器 30min，分别检测测定管和标准管的荧光值，同时向空白管和标准空白管的利余液中加入 0.05ml亚硫酸盐工作液，立即混匀，在 20~30s 内测出各管的荧光值，作为各自的空白值。