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阅读次数:15444 发布时间:2023/12/27 14:39:42
铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)的计算
产品简介:
铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,CP)又称为亚铁氧化酶或铜蓝蛋白氧化酶,是存在于肝脏、肾脏、血清等中的a2-糖蛋白,每个 CP 分子含有 6~8 个铜原子,其中 Cu2+和 Cu1+各占一半,故呈蓝色。CP 具有铁氧化还原酶活性,能使 Fe2+氧化为 Fe3+,CP 酶活性并非专一,可与 Fe2+、联苯胺、二甲基二苯胺、联大茴香胺等底物反应,可据此检测 CP 活性。
铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)其检测原理是铜蓝蛋白在弱酸条件下 CP催化胺底物,生成淡棕黄色产物,终止反应后生成紫红色溶液,通过分光光度计或酶标仪检测 540nm 处吸光度,根据公式可计算出 CP 活性,主要用于检测血清、血浆等样品中的铜蓝蛋白,50T 可检测23~24 个样品。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料:1 、蒸馏水2、水浴锅或恒温箱3、比色杯或96 孔板4、分光光度计或酶标仪操作步骤(仅供参考):1准备样品:@血浆、血清和尿液样品: 血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于该试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20“C冻存,用于 CP 的检测。@细胞或组织样品: 取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20“C冻存,用于CP 的检测
计算: CP 活力单位的定义 : 在*适 pH 和底物浓度下,1min 能催化 1pmol 底物所需的 CP 酶量为一个活力单位。其计算公式如下 :
CP活力(IU/L)=(A15mi-Asmn)x6*1000/(10x0.05x9.46)=(Asmin-Asmh)x1268式中:Asmin=测定管I的吸光度
415min=测定管的吸光度
6=反应液总体积(ml)
10=孵育时间差值(min)=15-50.05=样品用量(ml)9.46=吸光系数
注事事项
待测样品一般采用血清,4C可稳定 3天,20”C可稳定1个月12胺基质液应注意防止挥发,可以-20”C保存,12 个月有效
用含有柠檬酸、EDTA 抗凝血对本法测定有一定干扰
实验全程注意控制温度和 pH 值
5、加入 CP 终止液后,应立即混匀以终止酶促反应
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)的计算
原创作者:南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司