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铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)的计算

阅读次数 :15444    发布时间:2023/12/27 14:39:42

铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)的计算

产品简介:

铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,CP)又称为亚铁氧化酶或铜蓝蛋白氧化酶,是存在于肝脏、肾脏、血清等中的a2-糖蛋白,每个 CP 分子含有 6~8 个铜原子 ,其中 Cu2+ Cu1+各占一半,故呈蓝色 。CP 具有铁氧化还原酶活性,能使 Fe2+氧化为 Fe3+,CP 酶活性并非专一,可与 Fe2+、联苯胺、二甲基二苯胺、联大茴香胺等底物反应,可据此检测 CP 活性。

铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)其检测原理是铜蓝蛋白在弱酸条件下 CP催化胺底物,生成淡棕黄色产物 ,终止反应后生成紫红色溶液 ,通过分光光度计或酶标仪检测 540nm 处吸光度,根据公式可计算出 CP 活性 ,主要用于检测血清、血浆等样品中的铜蓝蛋白,50T 可检测23~24 个样品 。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

 

自备材料:、蒸馏水2 、水浴锅或恒温箱3、比色杯或96 孔板4、分光光度计或酶标仪操作步骤(仅供参考):1准备样品:@血浆、血清和尿液样品血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于该试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定 ,-20C冻存,用于 CP 的检测 。@细胞或组织样品取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20C冻存,用于CP 的检测

计算: CP 活力单位的定义 在*适 pH 和底物浓度下,1min 能催化 1pmol 底物所需的 CP 酶量为一个活力单位 。其计算公式如下 :

CP活力(IU/L)=(A15mi-Asmn)x6*1000/(10x0.05x9.46)=(Asmin-Asmh)x1268式中:Asmin=测定管I的吸光度

415min=测定管的吸光度

6=反应液总体积(ml)

10=孵育时间差值(min)=15-50.05=样品用量(ml)9.46=吸光系数

注事事项

待测样品一般采用血清 ,4C可稳定 3天,20C可稳定1个月12胺基质液应注意防止挥发,可以-20C保存,12 个月有效

用含有柠檬酸、EDTA 抗凝血对本法测定有一定干扰

实验全程注意控制温度和 pH 

5 、加入 CP 终止液后,应立即混匀以终止酶促反应

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)的计算

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