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大鼠血小板活化因子(PAF)elisa试剂盒使用说明书

阅读次数:900    发布时间:2017/4/28 19:52:43

 大鼠血小板活化因子(PAF)elisa试剂盒基本信息简介

    血小板活化因子(Platelet-Activating Factor)的缩写。一种强效生物活性磷脂 ,由白细胞、血小板 、内皮细胞、肺、肝和肾等多种细胞和器官产生 。PAF通过与靶细胞膜上的PAF受体结合而发挥作用 。可引起血小板聚集,中性粒细胞聚集和释放 ;产生大量活性氧、白三烯等炎性介质 。PAF阻断药 PAF通过与细胞膜受体结合发挥作用 , PAF受体阻断药能阻止PAF与受体结合,因此对与PAF生成过量有关的疾病如哮喘 、败血性休克等应当具有治疗意义。

大鼠血小板活化因子(PAF)elisa试剂盒操作注意事项简介

收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。5357cc拉斯维加斯首页入口提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用 ,如有特殊原因需要周期收集标本 ,请造模取材后 ,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀 ,应再次离心。

2. 血浆:应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂 ,加入 10 %( v/v )抗凝剂( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后 ,离心 20 分钟左右( 2000-3000 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时 ,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时 ,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右 。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份 。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS ,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用 。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验 ,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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