无乳链球菌-菌种复活的关键
西林瓶菌种打管复活操作步骤
1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面进行消毒。
2、在生物安全柜中打开铝制瓶盖和胶盖。
3、用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(《菌种说明书》中固体培养基去掉琼脂即可)于西林瓶中将冻干菌粉全部溶解。
4、将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中的 1-2滴菌悬液转接至固体培养基上。
5、将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养,以液体培养结果为准
中文名称:无乳链球菌
拉丁名称:Streptococcus agalactiae
特征特性:G+卵圆形菌,精氨酸双水解酶阴性,过氧化氢酶、尿素酶阴性,在10%胆汁中生长,发酵葡萄糖、蔗糖、海藻糖,不发酵乳糖、蜜二糖、阿拉伯糖、甘露醇、山梨醇。兼性厌氧,*适pH7.4~7.6。抗原属性:兰斯菲尔德B组,非溶血。
参考用途:分类学研究,质控菌株。
生物危害程度:三类
传播途径:经消化道、接触等
培养基名称:脑心琼脂
培养基成分:心提取物 5.0g,脑提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.4。推荐使用商品化成品培养基。
培养温度:37 ℃
使用注意事项:
1、 打管操作需由专业微生物技术人员在相应防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作。打管时冻干管应远离面部,并适当保护眼睛。
2、 打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完的冻干管应高压灭菌处理后丢弃。
3、 冻干管打开后需一次用完,不能留存。
4、 菌种经过冻干保藏后,处于休眠状态,一代菌种需适当延长培养时间,转接至 2-3 代恢复活力。