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点击次数:507 发布时间:2019/7/9 15:15:59
化学感受态细胞 底价供应 | |||||||
产品名称: 化学感受态细胞 | |||||||
其它名称:BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受态细胞 | |||||||
英文名称:Polysciences Polyethylenimine HCl MAX, Linear, Mw 40,000(PEI 40,000) | |||||||
CAS号:N/A | |||||||
规格:1g | |||||||
分类:化学感受态细胞 | |||||||
储存条件:请参照产品标签 | |||||||
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株染色体还整合了λ噬菌体DE3溶原体(其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因),可用于pET系列、pGEX、pMAL等载体的蛋白表达,同时具有四环素,氯霉素,链霉素和壮观霉素抗性。 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株基因型:F–ompT hsdS(rB–mB–)dcm+ TetRgal λ(DE3) endA Hte [argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR] 本品是大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热激转化。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。 2) 在冰上融化感受态细胞。 4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到。 5) 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。 1)从-80℃冰箱取出取感受态细胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌块融化,加入目的DNA,用手轻弹管底轻轻混匀,冰浴静置25min。 3)向每个离心管中加700 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。 4)低速离心收菌(比如4000rpm,2min),留取100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含氯霉素(34μg/ml)以及所选质粒筛选抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16h。 | |||||||
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更新时间:2025/4/25 14:33:42