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点击次数:336 发布时间:2025/3/18 15:17:43
枸橼酸钠(柠檬酸钠)是一种常用的体外抗凝剂,常用于牛血或其他动物血液的抗凝处理。以下是关于枸橼酸钠抗凝牛血的详细说明:
1. 作用机制
枸橼酸钠通过螯合血液中的钙离子(Ca??),阻断凝血级联反应中的关键酶(如凝血酶原酶复合物)的活性,从而防止血液凝固。钙离子是凝血过程中必不可少的辅因子,其被络合后,凝血过程被有效抑制。
2. 使用方法
抗凝剂浓度与比例
常用浓度:3.8% 枸橼酸钠溶液(即100 mL水中含3.8 g枸橼酸钠)。
抗凝比例:通常按 血液体积 : 抗凝剂体积 = 9:1 混合(如9 mL血液 + 1 mL抗凝剂)。
注意:牛血与人类血液抗凝比例基本一致,但具体比例可能需根据实验需求调整(如某些实验要求1:4或1:10)。
操作步骤
准备抗凝剂:配制3.8%枸橼酸钠溶液,灭菌后冷却至室温。
采集血液:无菌采集牛血,立即与抗凝剂混合,轻轻颠倒混匀。
储存条件:短期保存(数小时)可置于4℃冷藏;保存需结合其他方法(如添加营养剂)。
3. 适用范围
实验室检测:如血细胞计数、生化分析、凝血功能检测等。
血液成分分离:如制备血浆、血小板等。
教学或科研:用于血液生理、病理实验。
4. 注意事项
避免过量抗凝:过量枸橼酸钠可能导致血液稀释或细胞损伤。
温度控制:抗凝血液在低温下保存可减少细胞代谢和溶血风险。
后续处理:若需恢复血液凝固功能(如输血),可补充钙剂(如葡萄糖酸钙)。
禁忌:枸橼酸钠仅用于体外抗凝,不可直接输入体内(可能导致低钙血症)。
5. 常见问题
抗凝失败:可能因比例不当、血液与抗凝剂混合不充分,或血液已部分凝固。
溶血:采集或混匀过程中过度用力可能破坏红细胞。
保存期限:未添加保护剂的抗凝牛血通常可保存数天,需根据实验需求及时调整。
6. 替代方案
若需保存或特殊实验需求,可考虑:
肝素:适合细胞培养或某些生化实验,但可能影响酶活性。
EDTA:适合全血细胞计数,但可能抑制血小板功能。
通过以上方法,枸橼酸钠可有效抗凝牛血,满足大多数体外实验需求。具体操作需结合实验目的和条件调整。
更新时间:2025/4/25 14:34:35