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点击次数:325 发布时间:2025/3/18 15:34:38
阿氏液(Alsever's Solution)是一种常用的抗凝剂,主要用于禽类(如鸡)血液的抗凝处理,以保持血细胞的活性和功能。结合SPF(无特定病原体)鸡血的制备,以下是关键信息整理:
1. 阿氏液成分与抗凝原理
配方:
通常含葡萄糖(稳定红细胞膜)、柠檬酸钠(螯合钙离子,阻止凝血)、氯化钠(维持渗透压)及少量柠檬酸(调节pH)。具体配方可能因实验需求微调。
作用:
通过螯合血液中的钙离子,抑制凝血酶活性,同时提供营养(葡萄糖)维持细胞代谢。
2. SPF鸡血的意义
SPF(Specific Pathogen Free):
指实验鸡在无菌环境中饲养,经检测无特定病原体(如细菌、病毒、寄生虫等),确保血液样本的纯净性,适用于疫苗研发、血清学检测等高精度实验。
3. 制备步骤
抗凝剂与血液比例:
通常按 1:9(阿氏液:血液) 混合,例如1 mL阿氏液抗凝9 mL血液。
操作要点:
无菌采集:SPF鸡血需通过心脏穿刺或翅静脉采血,避免污染。
轻柔混合:抗凝剂与血液需充分混匀,防止局部凝固。
保存条件:短期(数天)可存于4℃;需-20℃或-80℃冻存(需添加冷冻保护剂如甘油)。
4. 应用场景
细胞实验:分离淋巴细胞、制备红细胞悬液等。
血清学检测:补体结合试验、血凝抑制试验等。
疫苗生产:作为抗原或培养基成分。
5. 注意事项
抗凝效果验证:使用前检查血液是否流动顺畅,无凝块。
避免反复冻融:冻存血液需分装,减少活性成分损失。
SPF资质确认:确保鸡群来源可靠,附权威检测报告。
6. 常见问题
血液凝固:可能因抗凝剂比例不足或混合不充分,需调整操作。
细胞活性下降:保存需优化冷冻保护剂(如10% DMSO)。
污染风险:SPF血液开封后需在无菌环境下操作,避免引入病原体。
如需具体实验方案或配方细节,建议参考《动物实验指南》或联系生物试剂供应商获取标准化流程。
更新时间:2025/4/25 14:34:35